lps刺激小鼠脾细胞是用多大浓度,多长时间(cba脾细胞培养时间)

lps刺激小鼠脾细胞是用多大浓度,多长时间

1、μg/ml。原理与T细胞增殖试验相同，但刺激物不同，小鼠B细胞可用细菌脂多糖（LPS）作为刺激物，人则用含SPA的金黄色葡萄球菌菌体及抗IgM抗体等刺激。使用无血清的培养基有些不妥，调成低血清含量的培养基倒是可以试试。

小鼠脾细胞什么时候需要传代培养

1、人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。

2、原代细胞：指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。传代细胞：幼年动物的肾、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉与肿瘤等组织的细胞。

3、传代培养 原代培养形成的单层细胞汇合以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生成空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭，都将影响细胞的生长，这一程序常称为传代或传代培养。

4、传代细胞培养：当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。

5、小鼠脾脏淋巴细胞在体外培养时是贴壁生长的。在体外培养时，需要将脾脏淋巴细胞悬液离心，去除组织碎片和杂质，然后将淋巴细胞重新悬浮在培养液中。在培养过程中，淋巴细胞会贴壁生长并增殖。

6、一般来说，细胞在传至10~50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。

HAT选择培养基的作用是筛选出什么

HAT选择培养基的作用是筛选出含有次黄嘌呤-鸟嘌呤核苷磷酸核糖基转移酶（HGPRT）或胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的细胞。HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的。

【答案】：用于筛选具有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HPRT）和胸苷激酶（TK）活性缺陷细胞的培养基，内含次黄嘌呤（hypoxanthine）、氨基喋呤（aminopterin）和胸腺嘧啶核苷（thymidine）三种，简称HAT。常用这种选择培养基来筛选杂交瘤细胞。

用于筛选具有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HPRT）或胸苷激酶（TK）活性缺陷细胞的培养基。是含有次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）、胸苷（T）和甘氨酸的完全培养基。

你看一下图上，标着HAT选择培养基的地方。图上的意思是，HAT选择培养基的作用是把能产生抗埃博拉病毒抗体的细胞筛选出来。存活的细胞就是指的被筛选出来的细胞，这些细胞能产生单克隆抗体的细胞。